1- هدف
هدف از تدوین این دستورالعمل تشریح انجام آزمایش C3c می باشد.
2 – دامنه کاربرد
اين دستورالعمل در واحد بیوشیمی برای انجام آزمایش C3c بر روی نمونه های سرم و پلاسما خون كاربرد دارد.
3 – مسئولیت اجراء
مسئوليت نظارت بر اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول کنترل کیفیت و سوپروایزر می باشد .
مسئوليت اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول واحد بیوشیمی می باشد .
4 – تعاریف
IFCC = فدراسیون بین المللی بیوشیمی بالینی
C3c یکی از اجزا سیستم کمپلمان است که در واکنش ایمونولوژیک و مقاومت بدن نسبت به برخی عفونتها نقش بازی می کند. اندازه گیری این ماده در تشخیص بعضی از عفونتها و کارایی سیستم ایمنی کاربرد دارد. از آنجا که C3c در هر دو مسیر کلاسیک و آلتر ناتیو کمپلمان فعال است مقدار آن و حتی میزان بقایای متابولیسم آن مثل C3c در تشخیص عملکرد سیستم کمپلمان و ایمنی بدن به کار می رود. نوع خاصی از آن به اسم فاکتور نفریت C3c بیماران دچار گلومرولونفریت مامبرنوپرولیفراتیو و لیپودیستروفی پارشیال یافت می گردد.
• عنوان آزمایش
Tina-Quant Complement C3c Ver2 ID:0-260
• اصول انجام آزمایش
ایمونوتوربیدیمتری
سرم انسان با آنتی سرم مربوطه رسوب میدهد و کدورتی ایجاد می کند که در 340 نانومتر اندازه گیری می شود.
5- شرایط نمونه :
– حداقل مقدار نمونه: 100 میکرولیتر
• نوع نمونه :
– سرم ، پلاسمای هپارینه (Li, NH4)
شرایط نمونه برداری :
– ناشتایی لازم ندارد.
• شرایط نگهداری و پایداری:
– C3c درسرم در دمای 25- 15 درجه سانتی گراد 4 روز و در دمای 8 – 2 درجه سانتی گراد 8 روز و در فریزر 8 روز پایدار می باشد.
توجه : در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا آن را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای آزمایش استفاده نمایید.
• شرایط رد یا قبول نمونه :
– عدم وجود بر چسب مشخصات نمونه
– مناسب نبودن لوله نمونه
– نامناسب بودن شرایط حمل نمونه
– همولیز : تا اندیکس 140 کنترل وصفی اثر ندارد .
6- مواد ، لوازم و تجهیزات
1- دستگاه نفلومتر و متعلقات مربوط به آن
2- لوله گاما /میکروکاپ
3- سمپلر و سر سمپلر
4- کیت C3-2
5- پارافیلم
6- نمونه سرم ، پلاسما(هر تست به 10 میکرو لیتر نمونه نیاز دارد.)
7- کنترل های کیت
8- NaCl 9.0 %
7- روش انجام آزمایش
پس از تهیه ورک لیست روزانه ، ابتدا نمونه ها را از واحد توزیع سرم تحویل گرفته و در ابتدا شرایط ظاهری نمونه ها را چک نمایید سپس در صورت مناسب بودن شرایط کنترل کیفیت مطابق دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)، نمونه ها جهت انجام آزمایش به دستگاه داده شود .مطابق با دستورالعمل انجام داخل کیت
8- کنترل کیفیت :
به دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative) مراجعه شود .
• دستورالعمل سریع کنترل کیفیت
در هر run جهت کنترل کیفی ازPercinorm 1 (غلظت نرمال) و Percipath 2 (غلظت پاتولوژیک) استفاده می شود. اعداد بدست آمده برای هر کنترل در منحنی Levey-jennings نقطه گذاری می گردند. در صورتیکه که قانونی نقض شده باشد ابتدا به مسئول کنترل کیفیت اطلاع داده شود و طبق نظر ایشان عمل شود. به صورت کلی براساس خطای ایجاد شده با توجه به نوع آن اقدام لازم بعمل می آید. به عنوان مثال اگر قانون مربوط به خطای دقتی باشد (مثل 13S,R4S ) بار دیگر کنترل به دستگاه داده می شود. اگر قانون مربوط به خطای سیستماتیک باشد ( مثل 22S, 41S, 10X) احتمالا خطا مربوط به کالیبر نبودن تست می باشد. لذا تست را کالیبر کنید. دوباره کنترل را بدهید. در صورتیکه مشکل همچنان باقیست، معرف (کنترل، کالیبراتور، کیتها ) و دستگاه را چک کنید. به عنوان مثال: ابتدا کنترل جدیدی تهیه کنید. اگر مشکل رفع نشد کالیبراتور جدیدی تهیه کنید اگر مشکل رفع نشد کیت جدیدی را امتحان کنید. اگر مشکل رفع نشد برنامه های مربوط به عملکرد دستگاه را بررسی کنید. چنانچه به نتیجه نرسیدید با شرکت اکبریه تماس بگیرید و مشکل را مطرح نمایید. چنانچه با عدم همکاری شرکت مذبور روبرو شدید با مسئول فنی موضوع را مطرح کنید.
9- نحوه محاسبه نتایج در روش های کمی :
دستگاه بطور خود کار میزان C3c را محاسبه می کند.
g/Lx 100 = mg/dl
10- محدوده مرجع (Reference Interval) :
بالغین : mg/dl 180-90
11- محدوده قابل اندازه گیری Reportable Range :
30- 500 mg/dl
12- محدوده هشدار یا مقادیر بحرانی :
ندارد .
• • ملاحظات ایمنی:
– در هنگام کار با نمونه ها حتما ازدستکش استفاده شود پس از پایان کار سطوح کاری با محلول ضدعفونی تمیز شوند.
– محلولهای موجود در کیت تحریک کننده اند. بنابراین از تماس آنها با چشم و دهان خودداری شود.
• • تفسیر
– تفسیر نتایج تواما با نتایج C4 امکان پذیر است .
13- ویژگی های آنالیتیک (خصوصیات و کارآیی آزمایش):
Within-run CV: بر طبق ادعا ی بروشور 1.5 % می باشد.
: Between-run CV بر طبق ادعای بروشور 6.0 % می باشد.
Expected: bet.CV< 2.6 BIAS< 4.1 TE<8.4
14- محدودیت های انجام آزمایش (منابع بالقوه تغییر پذیری) :
ندارد .
15- اقدامات بعدی دربرخورد با نتایج غیر طبیعی :
در صورت بیشتر یا کمتر بودن از محدوده مرجع تست با تکرار صحه گزاری می شود و در فرم ثبت نتایج آزمایشات تکراری باید ثبت شود . در صورت مقادیر اندازه گیری شده در محدوده بحرانی قرار گیرد ابتدا باید در فرم ثبت نتایج بحرانی اطلاعات نمونه ثبت شود. سپس مطابق دستورالعمل گزارش دهی نتایج بحرانی اطلاع رسانی لازم صورت می گیرد.
16- عوامل مداخله گر :
– گاما پاتی از نوع IgA , IgM می تواتند در اندازه گیری C3c تداخل ایجاد کنند.
• تداخلات دارویی :
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
همولیز ، لیپمی، ایکتروس، فاکتور روماتویید: اثری ندارند.
داروها : داروهای رایج اثری ندارند.
17- چگونگی تفسیر نتایج :
• موارد افزایش:
پروسه های التهاب، عفونت های سیستمی، بارداری، شرایط التهابی مزمن غیر عفونی (پلی آرتریت مزمن اولیه) انفارکتوس حاد قلبی، کانسر
• موارد کاهش:
فعال شدن سیستم کمپلمان، بیماریهای التهابی و عفونی، لوپوس، آرتریت روماتویید، ویرمی، SEPSIS باکتریال، عفونت انگلی، لیپودیستروفی پارشیال، سیروز، گلومرونفریت، سو تغذیه، هپاتیت، سندرم شوگرن
18- سایر موارد :
ندارد.
19- مراجع و ضمائم
1. بروشور کیت (2007-11-V6 En)
2. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 2007: 21 edition.
3. تفسیر تست های تشخیصی Pagana، 2005.
20 – مدارک مرتبط
1. جدول CV و Bias مجاز WWW.WESTGARD.COM))
2. دستورالعمل کار با نفلومتر
3. دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)
دیدگاه خود را درج کنید