LDL

1- هدف
هدف از تدوين اين دستورالعمل، تشريح روند انجام آزمایش LDL کلسترول خون می باشد.
2 – دامنه کاربرد
اين دستورالعمل در واحد بیوشیمی برای انجام آزمایش LDL کلسترول خون بر روی نمونه های سرم – پلاسما كاربرد دارد.


3 – مسئولیت اجراء
مسئوليت نظارت بر اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول کنترل کیفیت و سوپروایزر می باشد.
مسئوليت اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول واحد بیوشیمی می باشد.
4 – تعاریف
لیپوپروتئین ها یک پیشگویی کننده درست از بیماری کرونری قلبی در نظر گرفته می شوند. LDL کلسترول یونیزه غنی از کلسترول است به هر حال اکثریت کلسترول حمل شده توسط LDL می تواند در عروق خونی رسوب کرده و بنابراین سبب افزایش خطر بیماری آرترواسکلروتیکی قلب و بیماری عروق محیطی شود بنابراین سطح بالای LDL آتروژنیک است.
سطوح LDL در افراد با ریسک بیماری قلبی باید کمتر از 70mg/dl باشد در افراد با ریسک متوسط سطوح LDL باید کمتر مساوی 100mg/dl (بسته به سایر فاکتور های قلبی) باشد.
• عنوان آزمایش
LDL – Cholestrol Plus 2nd Generation ID : 031
• اصول انجام آزمایش
رنگ سنجی آنزیمی
LDL-Cholestrol ester + H2O Detergent Chol esrease Chol + FFA
LDL-Cholestrol + O2 Cholestol Oxidase ∆ 4 – Cholestenone + H2O2

HDSA + H+ + H2O peroxidase 2H2O2 + 4 – aminoantipyrine +
purple blue pigment + 5 H2O
(FFA = Free Fatty acid ، HDSA = سدیم ، هیدروکسی – سولفو پروپیل – دی متوکسی آنیلین)
شدت رنگ حاصل نسبت مستقیم با LDL – Chol دارد و با تعیین افزایش جذب نوری در nm 583 اندازه گیری می شود.
5- شرایط نمونه :
• حداقل مقدار نمونه :
هر تست به 2 میکرولیتر نمونه نیاز دارد اما در دستگاه کوباس با 100 لاندا نیز می توان تست را انجام داد
• نوع نمونه :
سرم – پلاسما (هپارینه یا EDTA)
• شرایط نمونه برداری :
ناشتایی حدود 12 تا 14 ساعت قبل از انجام تست غذای کم چربی بخورید و پس از آن ناشتا باشید. نوشیدن آب بلامانع است.
• شرایط نگهداری و پایداری:
LDL – C سرم در دمای 8- 2 درجه سانتی گراد 7 روز و در فریزر ( C°70-) 30 روز پایدار می باشد.
توجه 1 : در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا ان را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای ازمایش استفاده نمایید.
توجه 2: به هیچ وجه نمونه ها را در C°20- فریز نکنید (ترجیحأ نمونه را همان روز نمونه گیری آزمایش کنید)
• شرایط رد یا قبول نمونه :
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
ایکتروس : تا بیلی روبین غیر کونژوکه mg/dl 40 تاثیری ندارد.
همولیز : تا Hb =1000 mg/dl اثری ندارد.
لیپمی : تا L index = 400 (TG = 1200 mg/dl )
6- مواد ، لوازم و تجهیزات
1- . دستگاه اتو آنالایزر MINDRAY BS 380 و متعلقات مربوط به آن
2- لوله گاما /میکروکاپ
3- سمپلر و سر سمپلر
4- کیت LDL – C
5- پارافیلم
6- نمونه: سرم ، پلاسما (هر تست به 2 میکرو لیتر نمونه نیاز دارد.)
7- کنترل percinorm L, percipath HDL/LDL-C
8- کالیبراتور Cfas lipid
9- آب مقطر
10- Nacl 0.9%
7- روش انجام آزمایش :
پس از تهیه ورک لیست روزانه ، ابتدا نمونه ها را از واحد توزیع سرم تحویل گرفته و در ابتدا شرایط ظاهری نمونه ها را چک نمایید سپس در صورت مناسب بودن شرایط کنترل کیفیت مطابق دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)، نمونه ها جهت انجام آزمایش به دستگاه داده شود .
• کالیبراسیون :
جهت کالیبراسیون از cfas استفاده می گردد. پس از هر بار کالیبراسیون باید مجددا نمونه های کنترلی به دستگاه داده شوند. همچنین پس از هر بار سرویس دستگاه (از جمله تعویض پروب) نیز باید کالیبراسیون انجام گردد.
8- کنترل کیفیت :
به دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative) مراجعه شود .
• دستورالعمل سریع کنترل کیفیت
در هر run جهت کنترل کیفی از Percinorm 1 (غلظت نرمال) و Percipath 2 (غلظت پاتولوژیک) استفاده می شود. اعداد بدست آمده برای هر کنترل در منحنی Levey-jennings نقطه گذاری می گردند. در صورتیکه که قانونی نقض شده باشد ابتدا به مسئول کنترل کیفیت اطلاع داده شود و طبق نظر ایشان عمل شود. به صورت کلی براساس خطای ایجاد شده با توجه به نوع آن اقدام لازم بعمل می آید. به عنوان مثال اگر قانون مربوط به خطای دقتی باشد (مثل 13S,R4S ) بار دیگر کنترل به دستگاه داده می شود. اگر قانون مربوط به خطای سیستماتیک باشد ( مثل 22S, 41S, 10X) احتمالا خطا مربوط به کالیبر نبودن تست می باشد. لذا تست را کالیبر کنید. دوباره کنترل را بدهید. در صورتیکه مشکل همچنان باقیست، معرف (کنترل، کالیبراتور، کیتها ) و دستگاه را چک کنید. به عنوان مثال: ابتدا کنترل جدیدی تهیه کنید. اگر مشکل رفع نشد کالیبراتور جدیدی تهیه کنید اگر مشکل رفع نشد کیت جدیدی را امتحان کنید. اگر مشکل رفع نشد برنامه های مربوط به عملکرد دستگاه را بررسی کنید. چنانچه به نتیجه نرسیدید با شرکت اکبریه تماس بگیرید و مشکل را مطرح نمایید. چنانچه با عدم همکاری شرکت مذبور روبرو شدید با مسئول فنی موضوع را مطرح کنید.
9- نحوه محاسبه نتایج در روش های کمی :
دستگاه به طور اتوماتیک غلظت LDL را محاسبه می کند.
(mmol/L × 38.66 = mg/ dl)
10- محدوده مرجع (Reference Interval) :
Optimal : <100 mg/dl
Near Optimal : 100 – 129 mg/dl
Borderline high : 130 – 159 mg/dl
High : 160 – 189 mg/dl
Very high : > or = 190 mg/dl
11- محدوده قابل اندازه گیری Reportable Range :
3.87-550 mg/dl
12- محدوده هشدار یا مقادیر بحرانی :
ندارد

• • ملاحظات ایمنی:
• در هنگام کار با نمونه ها حتما ازدستکش استفاده شود پس از پایان کار سطوح کاری با محلول ضدعفونی تمیز شوند.
• کیت در دمای محیط نگهداری شود.
13- ویژگی های آنالیتیک (خصوصیات و کارآیی آزمایش):
Within-run CV: بر طبق ادعا ی بروشور 1.5% می باشد.
: Between-run CV بر طبق ادعای بروشور 1.9 % می باشد.
Expected: bet.CV<4.2 BIAS<6.8 TE<13.6
14- محدودیت های انجام آزمایش (منابع بالقوه تغییر پذیری) :
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
ایکتروس : تا بیلی روبین غیر کونژوکه mg/dl 40 تاثیری ندارد.
همولیز : تا Hb =1000 mg/dl اثری ندارد.
لیپمی : تا L index = 400 (TG = 1200 mg/dl )
استفاده از نمونه فریز شده در C°20- ، استفاده از پلاسمای EDTA : در این مورد باید جواب بیمار در 1.06 ضرب شده تا عدد واقعی LDL بدست آید
15- اقدامات بعدی در برخورد با نتایج غیر طبیعی :
در صورت بیشتر یا کمتر بودن از محدوده تست با تکرار صحه گذاری می شود.
16- عوامل مداخله گر :
تداخلات دارویی به شرح زیر دارد
• تداخلات دارویی :
افزایش : آسپرین، OCPs، فنوتیازین ها، استروئیدها، سولفونامیدها
17- چگونگی تفسیر نتایج :
به شرح زیر می باشد :
• موارد افزایش:
افزایش : Familial LDL Lipoproteinemia ، سندرم نفروتیک، بیماری ذخیره گلیکوژن، هایپوتیروئیدیسم، الکلیسم، بیماری مزمن کبدی، هپاتوم، سندرم کوشینگ
• موارد کاهش:
کاهش : Familial hypoproteinemia ، هایپوپروتئینمی (سوختگی شدید ، سوءتغذیه)، هایپوتیروئیدیسم
18- سایر موارد :
ندارد.
19- مدارک مرتبط
1- منحنی های کنترل کیفی
2- جداول CV و Bias مجاز WWW.WESTGARD.COM))
3- دستور کار با اتوآنالایزر MINDRAY BS 380
4- تفسیر قوانین وستگارد WWW.WESTGARD.COM))
20- مراجع و ضمائم
1- بروشور کیت (2008-01-V5 En)
2- Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 2007: 21 edition.
3- تفسیر تست های تشخیصی Pagana، 2011.

  • برچسب ها
  • اشتراک گذاری:

دیدگاه خود را درج کنید