1- هدف
هدف از تدوين اين دستورالعمل، تشريح انجام آزمایش و IgG خون می باشد.
2 – دامنه کاربرد
اين دستورالعمل در واحد بیوشیمی برای انجام آزمایش IgG بر روی نمونه های سرم – پلاسما – CSF كاربرد دارد.
3 – مسئولیت اجراء
مسئوليت نظارت بر اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول کنترل کیفیت و سوپروایزر می باشد.
مسئوليت اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول واحد بیوشیمی می باشد.
4 – تعاریف
IgG ایمونوگلوبولینی است که حدود 75 % از ایمونوگلوبولینی های سرمی را تشکیل داده است. پس عمده آنتی بادی گردشی در خون است.
• عنوان آزمایش
Immunoglobulin G (IgG) ID : 0-0276
• اصول انجام آزمایش
توربیدیمتری
IgG موجود در نمونه با آنتی سرم اختصاصی واکنش می دهد و کدورتی تشکیل می دهد که در 340 نانومتر اندازه گیری می شود.
5- شرایط نمونه :
• حداقل مقدار نمونه :
هر تست به 2 میکرولیتر نمونه نیاز دارد و در دستگاه کوباس با حداقل 100 میکرولیتر نیز تست خوانده می شود
• نوع نمونه :
سرم
پلاسما (هپارینه یا EDTA)
CSF به شرط آنکه آلوده نباشد. قبل از استفاده سانتریفوژ شود
• شرایط نمونه برداری :
ناشتایی نیاز ندارد
• شرایط نگهداری و پایداری:
IgG درسرم در دمای 25- 15 درجه سانتی گراد 4 ماه و در دمای 8- 2 درجه سانتی گراد 8 ماه و در فریزر 8 ماه پایدار می باشد.
IgGدر CSF در دمای 25- 15 درجه سانتی گراد 1 روز و در دمای 8- 2 درجه سانتی گراد 7 روز پایدار می باشد.
• شرایط رد یا قبول نمونه :
در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا آن را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای آزمایش استفاده نمایید.
6- مواد ، لوازم و تجهیزات
1- دستگاه اتو انالایزر Cobas Integra 400 و متعلقات مربوط به آن
2- لوله گاما / میکروکاپ
3- سمپلرو سر سمپلر
4- کیت IGGT
5- پارافیلم
6- نمونه :سرم، پلاسما و CSF (هر تست به 2 میکرو لیتر نمونه نیاز دارد.)
7- Percinorm U, Percipath Protein, Percinorm Protein
8- Serum Protein T Standard
9- سرم فیزیولوژی (NaCl 9%)
10- Accelerator I
7- روش انجام آزمایش
پس از تهیه ورک لیست روزانه، ابتدا نمونه ها را از واحد توزیع سرم تحویل گرفته و در ابتدا شرایط ظاهری نمونه ها را چک نمایید سپس در صورت مناسب بودن شرایط کنترل کیفیت مطابق دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)، نمونه ها جهت انجام آزمایش به دستگاه داده شود .
• کالیبراسیون :
جهت کالیبراسیون از cfas استفاده می گردد. پس از هر بار کالیبراسیون باید مجددا نمونه های کنترلی به دستگاه داده شوند. همچنین پس از هر بار سرویس دستگاه (از جمله تعویض پروب) نیز باید کالیبراسیون انجام گردد.
8- کنترل کیفیت :
به دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative) مراجعه شود .
• دستورالعمل سریع کنترل کیفیت
در هر run جهت کنترل کیفی از Percinorm 1 (غلظت نرمال) و Percipath 2 (غلظت پاتولوژیک) استفاده می شود. اعداد بدست آمده برای هر کنترل در منحنی Levey-jennings نقطه گذاری می گردند. در صورتیکه که قانونی نقض شده باشد ابتدا به مسئول کنترل کیفیت اطلاع داده شود و طبق نظر ایشان عمل شود. به صورت کلی براساس خطای ایجاد شده با توجه به نوع آن اقدام لازم بعمل می آید. به عنوان مثال اگر قانون مربوط به خطای دقتی باشد (مثل 13S,R4S ) بار دیگر کنترل به دستگاه داده می شود. اگر قانون مربوط به خطای سیستماتیک باشد ( مثل 22S, 41S, 10X) احتمالا خطا مربوط به کالیبر نبودن تست می باشد. لذا تست را کالیبر کنید. دوباره کنترل را بدهید. در صورتیکه مشکل همچنان باقیست، معرف (کنترل، کالیبراتور، کیتها) و دستگاه را چک کنید. به عنوان مثال: ابتدا کنترل جدیدی تهیه کنید. اگر مشکل رفع نشد کالیبراتور جدیدی تهیه کنید اگر مشکل رفع نشد کیت جدیدی را امتحان کنید. اگر مشکل رفع نشد برنامه های مربوط به عملکرد دستگاه را بررسی کنید. چنانچه به نتیجه نرسیدید با شرکت اکبریه تماس بگیرید و مشکل را مطرح نمایید. چنانچه با عدم همکاری شرکت مذبور روبرو شدید با مسئول فنی موضوع را مطرح کنید.
9- نحوه محاسبه نتایج در روش های کمی :
دستگاه به طور اتوماتیک غلظت IgG را محاسبه می کند.
(gl/L × 6.67 = μmol/L)
(gl/L × 100 = mg/dl)
(mg/dl × 6.67 = nmol/L)
10- محدوده مرجع (Reference Interval) :
سرم : mg/dl 700 – 1600 (بالغین)
CSF : mg/dl 0.63 – 3.35
11- محدوده قابل اندازه گیری Reportable Range :
mg/dl 0.02 – 3720
12- محدوده هشدار یا مقادیر بحرانی :
ندارد
• • ملاحظات ایمنی:
• در هنگام کار با نمونه ها حتما ازدستکش استفاده شود پس از پایان کار سطوح کاری با محلول ضدعفونی تمیز شوند.
• کیت در دمای محیط نگهداری شود.
13- ویژگی های آنالیتیک (خصوصیات و کارآیی آزمایش):
Within-run CV: بر طبق ادعا ی بروشور 1.4 % می باشد.
: Between-run CV بر طبق ادعای بروشور 2.1 % می باشد.
Expected: bet.CV<2.3 BIAS<4.3 TE<8.0
14- محدودیت های انجام آزمایش (منابع بالقوه تغییر پذیری) :
(معیار : بازیابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
ایکتروس : تاثیری ندارد.
همولیز : اثری ندارد.
لیپمی : تأثیری ندارد.
فاکتورهای روماتوئید: تا غلظت 800 IU/ml اثری ندارد.
15- اقدامات بعدی دربرخورد با نتایج غیر طبیعی :
در صورت بیشتر یا کمتر بودن از محدوده تست با تکرار صحه گذاری می شود
16- عوامل مداخله گر :
فقط تداخلات دارویی دارد
• تداخلات دارویی :
افزایش : گاماگلوبولین درمانی، هیدرالازین، INH، فنی توئین، OCPs، متادون، دکستران، استروئیدها، توکسوئید کزاز
17- چگونگی تفسیر نتایج :
• موارد افزایش:
عفونت های گرنولوماتوز(مثل Tb، گرنولوماتوز وگنر، سارکوئیدوز)واکنش های هیپرایمونیزاسیون و بیماری مزمن کبدی – مالتیپل میلوما (نوع مونوکلونالی IgG )- بیماری های اتوایمیون مثل آرتریت روماتوئید – بیماری شوگرن – SLE – دستگاهIUD
• موارد کاهش:
سندرم ویسکوت آلدریچ – آگاماگلوبولینمی- ایدز – هایپوپروتئینمی (مثل سندرم نفروتیک یا آنتروپاتی های دفع کننده پروتئین)- ایمونوساپرسیون های داروئی(مثل استروئیدها، دکستران)- مالتیپل میلومای غیر IgG – لوسمی
18- سایر موارد :
ندارد
19- مدارک مرتبط
1- منحنی های کنترل کیفی
2- جداول CV و Bias مجاز
3- دستور کار با اتوآنالایزر Cobas Integra400
4- تفسیر قوانین وستگارد
5- log book دستگاه کوباس اینتگرا
6- کتاب Pagana 2011
20 – مراجع و ضمائم
1- بروشور کیت (2008- 10 -V6 En)
2- Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 2007: 21 edition.
3- تفسیر تست های تشخیصی Pagana، 2011.
دیدگاه خود را درج کنید