1- هدف
هدف از تدوين اين دستورالعمل، تشريح انجام آزمایش C4 می باشد.
2 – دامنه کاربرد
اين دستورالعمل در واحد بیوشیمی برای انجام آزمایش C4 بر روی نمونه های سرم و پلاسما خون كاربرد دارد.
3 – مسئولیت اجراء
مسئوليت نظارت بر اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول کنترل کیفیت و سوپروایزر می باشد.
مسئوليت اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول واحد بیوشیمی می باشد.
4 – تعاریف
IFCC = فدراسیون بین المللی بیوشیمی بالینی
C4 یکی از اجزای سیستم کمپلمان است که در هر دو مسیر کلاسیک و آلترناتیو وجود دارد و در فعالسازی مسیر شرکت می کند . احتمال کاهش C4 در افراد وجود دارد ولی عدم حضور مطلق آن بسیار نادر است . کاهش C4 در بیماری های مرتبط با کمپلکس ایمنی دیده می شود . از قبیل لوپوس سیستمیک ، تیروئیدیت اتوایمیون، درماتو میوزیت جوانی ، بررسی کاهش C4 در تشخیص مراحل ابتدایی لوپوس و همچنین در بیماران با علائم خفیف به کار می رود .
همچنین در عفونتهای باکتریال و ویروسی مثل مننژیت ، عفونت استفیولوکوک و استافیلوکوکی ، پنومنیه ، افت C4 دیده میشود .
• عنوان آزمایش
Tina – quant Complement C4 Ver.2 (ID:0261)
• اصول انجام آزمایش
نفلومتریک
C4 سرم انسان با آنتی سرم مربوطه رسوب میدهد و کدورتی ایجاد می کند که در 340 نانومتر اندازه گیری می شود.
5- شرایط نمونه :
– حداقل مقدار نمونه : 100 میکرولیتر
توجه 1: نمونه دور از نور نگهداری شود.
توجه 2: در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا ان را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای ازمایش استفاده نمایید.
• نوع نمونه :
– سرم ، پلاسمای هپارینه (Li, NH4) یا EDTA
شرایط نمونه برداری :
ناشتایی لازم ندارد.
شرایط نگهداری و پایداری:
C4 سرم در دمای 25- 15 درجه سانتی گراد 2 روز و در دمای 8- 2 درجه سانتی گراد 2 روز پایدار می باشد.
توجه : در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا آن را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای آزمایش استفاده نمایید.
• شرایط رد یا قبول نمونه :
– عدم وجود بر چسب مشخصات نمونه
– مناسب نبودن لوله نمونه
– نامناسب بودن شرایط حمل نمونه
6- مواد ، لوازم و تجهیزات
1- دستگاه نفلومتر و متعلقات مربوط به آن
2- لوله گاما /میکروکاپ
3- سمپلر و سر سمپلر
4- کیت C4-2
5- پارافیلم
6- نمونه سرم ، پلاسما (هر تست به 28 میکرو لیتر نمونه نیاز دارد.)
7- کنترل Percinorm protein و percipath protein
8- NaCl 9.0 %
7- روش انجام آزمایش
پس از تهیه ورک لیست روزانه ، ابتدا نمونه ها را از واحد توزیع سرم تحویل گرفته و در ابتدا شرایط ظاهری نمونه ها را چک نمایید سپس در صورت مناسب بودن شرایط کنترل کیفیت ، نمونه ها جهت انجام آزمایش به دستگاه داده شود .مطابق دستورالعمل اجرایی داخل کیت
8- کنترل کیفیت :
به دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative) مراجعه شود .
• دستورالعمل سریع کنترل کیفیت
در هر run جهت کنترل کیفی از Percinorm U (غلظت نرمال) و Percipath U (غلظت پاتولوژیک ) استفاده می شود. اعداد بدست آمده برای هر کنترل در منحنی Levey-jennings نقطه گذاری می گردند. در صورتیکه که قانونی نقض شده باشد با توجه به نوع آن اقدام لازم بعمل می آید. به عنوان مثال اگر قانون مربوط به خطای دقتی باشد (مثل 13S,R4S ) بار دیگر کنترل به دستگاه داده می شود. اگر قانون مربوط به خطای سیستماتیک باشد ( مثل 22S, 41S, 10X) احتمالا خطا مربوط به کالیبر نبودن تست می باشد. لذا تست را کالیبر کنید. دوباره کنترل را بدهید. در صورتیکه مشکل همچنان باقیست، معرف (کنترل، کالیبراتور، کیتها ) و دستگاه را چک کنید. به عنوان مثال: ابتدا کنترل جدیدی تهیه کنید. اگر مشکل رفع نشد کالیبراتور جدیدی تهیه کنید اگر مشکل رفع نشد کیت جدیدی را امتحان کنید. اگر مشکل رفع نشد برنامه های مربوط به عملکرد دستگاه را بررسی کنید. چنانچه به نتیجه نرسیدید با شرکت اکبریه تماس بگیرید و مشکل را مطرح نمایید. چنانچه با عدم همکاری شرکت مذبور روبرو شدید با مسئول فنی موضوع را مطرح کنید.
9- نحوه محاسبه نتایج در روش های کمی :
دستگاه بطور خود کار میزان C4 را محاسبه می کند.
g/Lx 100 = mg/dl
10- محدوده مرجع (Reference Interval) :
– بالغین 10- 40 mg/dl
11- محدوده قابل اندازه گیری Reportable Range :
6- 100 mg/dl
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
12- محدوده هشدار یا مقادیر بحرانی :
– ندارد
• • ملاحظات ایمنی:
– در هنگام کار با نمونه ها حتما ازدستکش استفاده شود پس از پایان کار سطوح کاری با محلول ضدعفونی تمیز می شوند.
13- ویژگی های آنالیتیک (خصوصیات و کارآیی آزمایش):
Within-run CV: بر طبق ادعا ی بروشور 1.1% می باشد.
: Between-run CV بر طبق ادعای بروشور 4.6 % می باشد.
Expected: bet.CV<4.5 BIAS<8.6 TE<16
14- محدودیت های انجام آزمایش (منابع بالقوه تغییر پذیری) :
تماس نمونه با نور خورشید یا لامپ باعث کاهش بیلی روبین می شود.
15- اقدامات بعدی دربرخورد با نتایج غیر طبیعی :
در صورت بیشتر یا کمتر بودن از محدوده مرجع تست با تکرار صحه گزاری می شود و در فرم ثبت نتایج آزمایشات تکراری باید ثبت شود . در صورت مقادیر اندازه گیری شده در محدوده بحرانی قرار گیرد ابتدا باید در فرم ثبت نتایج بحرانی اطلاعات نمونه ثبت شود. سپس مطابق دستورالعمل گزارش دهی نتایج بحرانی اطلاع رسانی لازم صورت می گیرد .
16- عوامل مداخله گر :
– همولیز، لیپمی، ایکتروس، فاکتور روماتویید: اثری ندارند.
– داروها : داروهای رایج اثری ندارند.
• تداخلات دارویی :
– گاما پاتی از نوع IgA , IgM می توانند در اندازه گیری C3c تداخل ایجاد کنند.
17- چگونگی تفسیر نتایج :
– تفسیر نتایج براساس همخوانی با نتایج C3 باید انجام شود .
• موارد افزایش:
– پروسه های التهاب، عفونت های سیستمی، بارداری، شرایط التهابی مزمن غیر عفونی (پلی آرتریت مزمن اولیه) ، انفارکتوس حاد قلبی، کانسر
• موارد کاهش:
– فعال شدن سیستم کمپلمان در بیماریهای ایمونوکمپلکس( لوپوس )، مننژیت باکتریال، سپسیس استرپتوککی و استافیلوککی و پنومونی، سیروز، گلومرونفریت، سو تغذیه، هپاتیت، سندرم شوگرن
18- سایر موارد :
ندارد.
19- مراجع و ضمائم
1. بروشور کیت (2007-11-V6 En)
2. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 2007: 21 edition.
3. تفسیر تست های تشخیصی Pagana، 2005.
20 – مدارک مرتبط
1. جدول CV و Bias مجاز WWW.WESTGARD.COM))
2. دستورالعمل کار بانفلومتر
3. دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)
دیدگاه خود را درج کنید