1- هدف
هدف از تدوين اين دستورالعمل، تشريح روند انجام آزمایش IgA خون می باشد.
2 – دامنه کاربرد
اين دستورالعمل در واحد بیوشیمی برای انجام آزمایش IgA بر روی نمونه های سرم – پلاسما كاربرد دارد.
3 – مسئولیت اجراء
مسئوليت نظارت بر اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول کنترل کیفیت و سوپروایزر می باشد.
مسئوليت اجرای صحیح این دستورالعمل بر عهده مسئول واحد بیوشیمی می باشد.
4 – تعاریف
پروتئین های خون از آلبومین و گلوبولین تشکیل شده اند. گلوبولین ها چند نوعند که یکی از آنها گاماگلوبولین است . آنتی بادی از گاماگلوبولین ساخته شده و ایمونوگلوبولین نام می گیرد انواع متعددی از ایمونوگلوبولین (آنتی بادی) وجود دارند
IgA نزدیک به 15% از ایمونوگلوبولینهای بدن را تشکیل داده و اساسا ترشحات دستگاه تنفسی، گوارش، بزاق، کلستروم و اشک وجود دارد همچنین IgA به مقدار ناچیز در خون یافت می شود.
• عنوان آزمایش
Immunoglobulin A (IgA) ID : 0-075
• اصول انجام آزمایش
ایمنوتوربیدیمتری (340 Nmv )
IgA موجود در نمونه با آنتی سرم اختصاصی رسوبی تشکیل می دهد که کدورت آن در nm 340 اندازه گیری می شود.
5- شرایط نمونه :
• حداقل مقدار نمونه :
هر تست به 5 میکرولیتر نمونه نیاز دارد و اما در دستگاه کوباس اینتگرا 400 به حداقل 100 میکرولیتر سرم نیاز دارد.
• نوع نمونه :
سرم – پلاسما (هپارینه EDTA )
• شرایط نمونه برداری :
ناشتایی لازم ندارد
• شرایط نگهداری و پایداری:
IgA درسرم در دمای 25- 15 درجه سانتی گراد 8 روز و در دمای 8- 2 درجه سانتی گراد 8 هفته و در فریزر 8 ماه پایدار می باشد.
• شرایط رد یا قبول نمونه :
در صورت مشاهده ذرات یا رسوب در نمونه ابتدا ان را سانتریفیوژ کنید و از قسمت رویی برای ازمایش استفاده نمایید.
6- مواد ، لوازم و تجهیزات
1- دستگاه اتو آنالایزر Cobas Integra 400 و متعلقات مربوط به آن
2- لوله گاما /میکروکاپ
3- سمپلر و سر سمپلر
4- کیت IgA (ID : 075 )
5- پارافیلم
6- نمونه: سرم پلاسما (هر تست به 5 میکرو لیتر نمونه نیاز دارد.)
7- کنترل Protein PN Protein , PP یا percinorm U
8- کالیبراتور Serum Protein T Standard
9- سرم فیزیولوژی 0.9%
10- Accelerator I که رقیق کننده ویژه تست می باشد و تا 7 روز در دستگاه پایداراست .
7- روش انجام آزمایش
پس از تهیه ورک لیست روزانه ، ابتدا نمونه ها را از واحد توزیع سرم تحویل گرفته و در ابتدا شرایط ظاهری نمونه ها را چک نمایید سپس در صورت مناسب بودن شرایط کنترل کیفیت مطابق دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative)، نمونه ها جهت انجام آزمایش به دستگاه داده شود.
• کالیبراسیون :
جهت کالیبراسیون از cfas استفاده می گردد. پس از هر بار کالیبراسیون باید مجددا نمونه های کنترلی به دستگاه داده شوند. همچنین پس از هر بار سرویس دستگاه (از جمله تعویض پروب) نیز باید کالیبراسیون انجام گردد.
8- کنترل کیفیت :
به دستورالعمل کنترل کیفیت آزمایشهای کمی (Quantitative) مراجعه شود.
• دستورالعمل سریع کنترل کیفیت
در هر run جهت کنترل کیفی از Percinorm 1 (غلظت نرمال) و Percipath 2 (غلظت پاتولوژیک) استفاده می شود. اعداد بدست آمده برای هر کنترل در منحنی Levey-jennings نقطه گذاری می گردند. در صورتیکه که قانونی نقض شده باشد ابتدا به مسئول کنترل کیفیت اطلاع داده شود و طبق نظر ایشان عمل شود. به صورت کلی براساس خطای ایجاد شده با توجه به نوع آن اقدام لازم بعمل می آید. به عنوان مثال اگر قانون مربوط به خطای دقتی باشد (مثل 13S,R4S ) بار دیگر کنترل به دستگاه داده می شود. اگر قانون مربوط به خطای سیستماتیک باشد ( مثل 22S, 41S, 10X) احتمالا خطا مربوط به کالیبر نبودن تست می باشد. لذا تست را کالیبر کنید. دوباره کنترل را بدهید. در صورتیکه مشکل همچنان باقیست، معرف (کنترل، کالیبراتور، کیتها ) و دستگاه را چک کنید.به عنوان مثال: ابتدا کنترل جدیدی تهیه کنید. اگر مشکل رفع نشد کالیبراتور جدیدی تهیه کنید اگر مشکل رفع نشد کیت جدیدی را امتحان کنید. اگر مشکل رفع نشد برنامه های مربوط به عملکرد دستگاه را بررسی کنید. چنانچه به نتیجه نرسیدید با شرکت اکبریه تماس بگیرید و مشکل را مطرح نمایید. چنانچه با عدم همکاری شرکت مذبور روبرو شدید با مسئول فنی موضوع را مطرح کنید.
9- نحوه محاسبه نتایج در روش های کمی :
دستگاه به طور اتوماتیک غلظت IgA را محاسبه می کند.
(g/L × 6.25 = μmol/L)
(μmol/L × 0.16 = g/L)
10- محدوده مرجع (Reference Interval) :
بالغین : mg/dl 70 – 400
کودکان : 1 – 350 mg/dl
11- محدوده قابل اندازه گیری Reportable Range :
60 – 730 mg/dl
12- محدوده هشدار یا مقادیر بحرانی :
ندارد
• • ملاحظات ایمنی:
• در هنگام کار با نمونه ها حتما ازدستکش استفاده شود پس از پایان کار سطوح کاری با محلول ضدعفونی تمیز شوند.
• کیت در دمای محیط نگهداری شود.
13- ویژگی های آنالیتیک (خصوصیات و کارآیی آزمایش):
Within-run CV: بر طبق ادعا ی بروشور 2-0.97می باشد.
: Between-run CV بر طبق ادعای بروشور 2.3-1.2می باشد.
Expected: Bet.CV<2.7 BIAS<9.1 TE<13.5
14- محدودیت های انجام آزمایش (منابع بالقوه تغییر پذیری) :
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
ایکتروس : تاثیری ندارد.
همولیز : اثری ندارد.
لیپمی : تا L index= 750 تأثیری ندارد.
15- اقدامات بعدی دربرخورد با نتایج غیر طبیعی :
در صورت بیشتر یا کمتر بودن از محدوده تست با تکرار صحه گذاری می شود .
16- عوامل مداخله گر :
(معیار : باز یابی در محدوده 10% ± از مقدار اولیه)
ایکتروس : تاثیری ندارد.
همولیز : اثری ندارد.
لیپمی : تا L index= 750 تأثیری ندارد.
• تداخلات دارویی :
عبارتند از: گاماگلوبولین درمانی، هیدرالازین، ایزونیازید(INH)، فنی توئین، OCPs، متادون، دکستران، استروئید، توکسویید کزاز
17- چگونگی تفسیر نتایج :
• موارد افزایش:
بیماری مزمن کبدی(مثل سیروز صفراوی اولیه)، عفونت های مزمن، بیماری التهابی روده
• موارد کاهش:
آتاکسی(تلانژکتازی)- نقص منفرد مادرزادی هیپوپروتئینی (مثل سندرم نفروتیک یا آنتروپاتی های دفع کننده پروتئین) داروهای ایمونوساپرسیو (مثل استروئیدها و دکستران)
18- سایر موارد :
ندارد
19- مدارک مرتبط
1- منحنی های کنترل کیفی
2- جداول CV و Bias مجاز
3- دستور کار با اتوآنالایزر Cobas Integra400
4- تفسیر قوانین وستگارد
5- log book دستگاه کوباس اینتگرا
20 – مراجع و ضمائم
1- بروشور کیت (2008 – 10 -V7 En)
2- Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 2007: 21 edition.
3- کتاب Pagana، 2011.
دیدگاه خود را درج کنید